葉綠素儀是一種葉綠素測量儀器,能夠在較短時間內(nèi)測量出農(nóng)作物葉綠素含量,儀器精致小巧、攜帶方便,同時測量方法也十分簡單,只需要將葉片放置于葉綠素測定儀的探頭上并合上測量探頭就可以測量獲得農(nóng)作物葉綠素含量。
通過這種儀器有利于合理施加氮肥,提高氮的利用率,并可保護(hù)環(huán)境(防止施加過多的氮肥而使環(huán)境特別是水源受到污染),因此,葉綠素儀廣泛應(yīng)用于農(nóng)林相關(guān)科研單位和高校對植物生理指標(biāo)的研究和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的指導(dǎo)。
葉綠素儀的原理:
葉綠素儀根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收,利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度,即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律,某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位,液層厚度為1cm時,α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì),則此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量,只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A,并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時為了排除類胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的大吸收峰。
葉綠素儀的使用方法:
1、首先將葉綠素儀的測量頭夾在葉片兩端,按下測量頭。
2、在使用葉綠素儀校準(zhǔn)過程中,測量頭不夾樣品,二個LED次序發(fā)光,被接收的光轉(zhuǎn)換成電信號,光強(qiáng)度的比率被用來計算。
3、在葉綠素儀的測量頭夾住樣品后,二個LED再次發(fā)光,通過葉片傳輸?shù)墓獯虻浇邮掌魃?,被轉(zhuǎn)換成電信號,傳輸光的強(qiáng)度比率被計算。
4、步驟1和2的值用于計算SPAD測量值,就可以分析出所測葉片的葉綠素含量。